Milhares de microrganismos vivem no interior e ao redor de nossos corpos e, muitos deles, podem ocasionar doenças graves. Para estudar os microrganismos foram desenvolvidas diversas técnicas para isolar e identificar o agente em laboratório. Show
A microbiologia clínica tem um papel importante no diagnóstico e controle de doenças infecciosas. Porém a qualidade da análise está diretamente relacionada a qualidade de espécime coletado do paciente, a maneira como é transportado e as técnicas para detecção do microrganismo na amostra. A maioria dos testes baseia-se na capacidade de crescimento do microrganismo. Assim, as condições de coleta e transporte são fundamentais para garantir a viabilidade do patógeno. Mas o que é necessário para cultivar microrganismos em laboratório? Meios de CulturaDiferentes microrganismos têm diferentes exigências para o seu crescimento. Para que seja possível realizar a cultura e análise em laboratório é necessário conhecer quais as necessidades nutritivas e condições físicas para cada um. O material nutriente preparado para o crescimento de microrganismos é chamado de meio de cultura. Pelo fato de a cultura em laboratório ser requerida para o estudo detalhado de qualquer microrganismo, é necessária atenção criteriosa na seleção e no preparo dos meios para que o cultivo seja bem-sucedido. Deve-se verificar também a quantidade de água suficiente, pH adequado e a presença ou não de oxigênio. Cultivo de microrganismos em laboratórioPara a identificação do patógeno é necessário que uma amostra seja obtida do lugar da infecção. A amostra deve ser coletada com cuidado evitando contaminação com outros organismos. Depois o meio de cultura com os nutrientes necessários é preparado e esterilizado. Assim, garante-se que não há nenhuma outra forma de vida ou contaminação no meio. O patógeno é então inoculado. A cultura é incubada em condições que permitem o crescimento. Normalmente a inoculação será de uma cultura pura em um meio líquido ou sólido.
Principais meios de cultura utilizados e suas aplicaçõesMeio Stuart PrincípioA carência de uma fonte de nitrogênio impede consideravelmente a multiplicação de microrganismos e a composição nutritiva garante a sobrevivência deles. Utilidade
Agar NutrientePrincípioO Nutriente ágar é um meio relativamente simples, de fácil preparação e muito usado nos procedimentos do laboratório de microbiologia. Utilidade
Agar CLED – Cystine Lactose Electrolyte DeficientPrincípioUsado para isolamento e quantificação de microrganismos presentes em amostras urina. A deficiência de eletrólitos inibe o véu de cepas de Proteus. Utilidade
Agar Mueller HintonPrincípioÁgar padronizado por Kirby e Bauer e pelo NCCLS que oferece condições de crescimento das principais bactérias. Utilidade
Agar MacConkeyPrincípioO cristal violeta inibe o crescimento de microrganismos Gram positivos especialmente enterococos e estafilococos. A concentração de sais de bile é relativamente baixa em comparação com outros meios, por isso não é tão seletivo para Gram negativos como, por exemplo, o ágar SS. Utilidade
Agar Salmonella Shigella (SS)PrincípioÁgar SS possui componentes (sais de bile, verde brilhante e citrato de sódio) que inibem microrganismos Gram positivos. A incorporação de lactose ao meio permite diferenciar se o microrganismo é lactose positiva (bactérias que fermentam a lactose produzem ácido que na presença do indicador vermelho neutro resultando na formação de colônias de cor rosa) e bactérias que não fermentam a lactose formam colônias transparentes. O tissulfato de sódio e o citrato férrico permitem a detecção de H²S evidenciado por formação de colônias de cor negra no centro. Utilidade
Agar Sabouraud DextrosePrincípioMeio com nutrientes que favorece o crescimento de diversos fungos leveduriformes e filamentosos. Utilidade
Agar Sal ManitolPrincípioO meio consiste na caseína digerida e tecido animal, extrato de carne, manitol, sais e vermelho de fenol. Os estafilococos podem crescer na presença de elevadas concentrações de sal e o S. aureus pode fermentar o manitol produzindo colônias de cor amarela. Utilidade
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Por que é necessário realizar a esterilização de meios de cultura e materiais utilizados na microbiologia?O principal objetivo é remover totalmente a capacidade reprodutiva de todos microrganismos indesejáveis para uma determinada análise, deixando o meio de cultura propício somente para o objeto de estudo.
Qual a importância da esterilização de materiais e meios de cultura antes e depois das práticas de microbiologia?Todo material contaminado antes de ser lavado, deve passar pelo processo de esterilização, para que toda a sua flora microbiológica seja completamente destruída, evitando-se que o mesmo seja uma fonte de contaminação.
O que é esterilização em microbiologia?A esterilização é um processo que visa a destruir todas as formas de vida microbianas que possam contaminar materiais e objetos. São eliminados durante a esterilização organismos como vírus, bactérias e fungos.
Como proceder para esterilizar materiais para realizar testes de microbiologia?Bancadas, na superfície das quais são realizadas as análises microbiológicas, devem ser limpas com álcool 70% antes de iniciar a análise e ao término da mesma. O piso do laboratório de microbiologia é limpo e desinfetado diariamente com 5 mL de solução de hipoclorito de sódio a 2% , em um litro de água.
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Qual a necessidade de esterilização do cultivo microbiológico após a leitura?
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