Qual a diferença de bactérias Gram positivas e negativas?

Através de procedimentos histológicos, foi desenvolvida em 1889, pelo microbiologista Hans Chistian Gram, uma técnica empregada em análise patológica para a identificação das bactérias.

Por aplicação da técnica, tendo como resultado a diferenciação no aspecto pigmentar, estes microorganismos causadores de doenças passaram a ser identificados em dois grupos básicos: as bactérias Gram-positivas e as bactérias Gram-negativas.

Para efetuar a distinção por esta metodologia, as culturas bacteriológicas são submetidas a um tratamento com corante de coloração violeta (violeta de genciana).

Tendo em vista a estruturação citológica das bactérias, isto é, de suas células, as bactérias podem apresentar características estruturais incomuns de acordo com a espécie. Algumas possuem além da membrana plasmática e a parede celular (formadas por elementos peptidoglicanos que integram a parede celular), uma terceira camada lipoprotéica de revestimento, de considerável espessura, contendo lipopolissacarídeos.

Tal diversidade bacteriana, quando aplicado à técnica, resulta em dois padrões de coloração:

- As bactérias que não possuem a camada com lipídios associados a polissacarídeos são coradas com violeta de genciana, que impregna a camada peptidoglicana. Estas bactérias, por assimilação ao corante, são classificadas como Gram-positivas;

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- Já as bactérias que em sua morfologia apresentam as três camadas, não são coradas pelo corante, devido a não afinidade entre a pigmentação e a camada de lipopolissacarídeos, que também impede a fixação do corante com a camada de peptidoglicana subjacente. Portanto, essas bactérias são classificadas como Gram-negativas.

Este critério de identificação auxilia, por exemplo, o tratamento a estes agentes etiológicos (as bactérias), visto que as Gram-negativas são mais tolerantes e as Gram-positivas são mais sensíveis a antibióticos (penicilina).

Exemplos de bactérias Gram-negativas:

Pseudomonas aeruginosas – provoca infecções urinárias e respiratórias;

Escherichia coli – causa infecções urinárias e gastroenterites, agindo sobre o sistema digestório;

Vibrio colerae – bactéria que provoca a cólera.

Exemplos de bactérias Gram-positivas:

Clostridium tetani – causa tétano;

Staphylococcus aureus - provoca infecções nas vias respiratórias;

Streptococcus pneumoniae – causa pneumonia, desencadeando uma infecção pulmonar.

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Índice

• 1 Definição
• 2 Classificação das Bactérias Gram-negativas
  • 2.1 Método de coloração de Gram
  • 2.2 Diferença entre gram-positivas e gram-negativas
• 3 Bactérias Gram-negativas de interesse em saúde e suas patologias
  • 3.1 Posts relacionados:
  • 3.2 Referências:

Definição

As bactérias gram-negativas são de grande importância clínica, pois estão associadas a uma série de patologias muito comuns como: infecções intestinais e urinárias, meningite e ISTs.

Essas bactérias são tidas como negativas devido ao fato de se corarem em rosa no método coloração de Gram (vista a diante) – por conta de suas características, que são morfologicamente distintas das bactérias gram-positivas.

Classificação das Bactérias Gram-negativas

Método de coloração de Gram

Esse método foi desenvolvido pelo bacteriologista dinamarquês Hans Christian Gram em 1884, com o propósito de identificar as características morfológicas das bactérias e assim facilitar o estudo microscópico. Consiste nas etapas seguintes:

1. Preparação do esfregaço, que é fixado pelo calor; A lâmina é coberta com o corante cristal violeta até impregnar todas as células (coloração primária) – em média 1 minuto, após esse tempo o esfregaço é lavado;
2. O esfregaço então é recoberto por uma solução de iodo (lugol) por aproximadamente 1 minuto, e depois é lavado novamente. Ambos os grupos (gram – e gram +) se encontram corados em púrpura ou violeta escuro nesse momento;
3. A preparação é lavada com uma solução descolorante (álcool ou álcool-acetona) por cerca de 30 segundos. O esfregaço é lavado com água destilada e após essa etapa é possível observar que um grupo de bactérias estará descolorido (gram – );
4. A lâmina é coberta com fucsina ou safranina (corante vermelho) durante 30-45 segundos e depois lavado com água destilada. Por fim, o esfregaço é seco com papel filtro e é possível observar pelo microscópio a coloração final: as gram-positivas coradas em púrpura e as gram-negativas coradas em rosa.

Em síntese, as bactérias gram-positivas retém o corante púrpura e o iodo, eles penetram na parede celular (que, possui uma camada espessa de peptídeoglicano) e o álcool não consegue remover o corante da mesma. Por esse motivo, não sofrem modificação ao serem contracoradas com a fucsina ou safranina.

Já nas bactérias gram-negativas, a lavagem com o álcool consegue romper a camada externa (LPS) que esse grupo possui e com isso, remove o corante púrpura das células (a camada de peptídeoglicano das gram – é delgada, o que facilita a ação do agente descolorante). Assim, as gram-negativas se tornam incolores e depois são contracoradas com o a fucsina ou safranina, adquirindo a cor rosa.

Diferença entre gram-positivas e gram-negativas

As bactérias gram-positivas têm a sua parede celular composta por uma camada espessa de peptídeoglicano, ácidos teicoicos e fosfato;

As bactérias gram-negativas, possuem uma fina camada de peptídeoglicano no espaço periplasmático e uma membrana externa – bicamada lipídica que contém lipopolissacarídeos/endotoxina (LPS), lipoproteínas e porinas.

Obs. As bactérias gram-positivas não são resistentes a penicilinas ou cefalosporinas (antibióticos que atuam na lise da parede celular) ao contrário das gram-negativas, que por possuírem a camada externa, impedem a penetração desses antibióticos.

Bactérias Gram-negativas de interesse em saúde e suas patologias

Muitas bactérias gram-negativas causam patologias nos seres humanos, e  como já exposto, elas costumam ser resistentes a determinados antibióticos. A seguir, algumas espécies de bactérias gram-negativas patogênicas e doenças causadas pelas mesmas:

• Treponema pallidum – sífilis;
• Vibrio cholerae – cólera (grande importância histórica);
• Chlamydia trachomatis – clamidíase; 
• Neisseria meningitidis – meningite bacteriana;
• Neisseria gonorrhoeae – gonorreia;
• Yersinia pestis – peste bubônica, (grande importância histórica);
• Bordetella pertussis – coqueluche;
• Salmonella – febre tifoide;
• Escherichia coli – infecções intestinais e urinárias.

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Referências:

TORTORA, G.J., FUNKE, B.R., CASE, C.L. Microbiologia,10ª Ed. Porto Alegre: Artmed, 2012. 967p.

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